Аналізи для виявлення генітального герпесу

Якщо у вас на геніталіях виникли виразки, доктор може взяти з них мазки-відбитки, щоб перевірити їх на наявність вірусу простого герпесу (ВПГ). Одним із методів дослідження є ізоляція вірусу на клітинній культурі. Всім вірусам із взятого зразка дають можливість безперешкодно ділитися, що робить їх добре помітними під мікроскопом.

Наступною різновидом тестувань є реакція імунофлюоресценції. До зразком додають розчин, що містить антитіла до ВПГ і флуоресцентний барвник. Антитіла – це протеїни, вироблені імунної системи у відповідь на інфекцію. Якщо вірус присутній в зіскобі, до нього пристають антитіла, які світяться при перегляді через спеціальний мікроскоп.

Ці тестування хороші тим, що дозволяють розрізняти два типу ВПГ. Важливо знати, яким саме типом вірусу заражені ви. Якщо у вас знайдуть вірус простого герпесу 2-го типу (ВПГ-2), то спалаху захворювання можуть траплятися частіше, ніж, якщо б у вас знайшли вірус простого герпесу 1-го типу (ВПГ-1). Більше того, знання про тип вірусу може стати підказкою у процесі визначення способу зараження. ВПГ-1 часто вражає геніталії під час орального сексу, ВПГ-2 зазвичай передається при вагінальному або анальному сексі.

Ці тестування можуть показати псевдонегативний результат, якщо герпетичні виразки вже почали гоїтися, або симптоми проявляються у вас не вперше. Тим не менш, позитивний результат, отриманий в результаті одного з цих тестів, є досить точним.

Аналізи крові на генітальний герпес

Аналіз крові може виявити антитіла до ВПГ навіть при відсутності будь-яких симптомів. Псевдонегативний результат аналізу крові можливий у тому випадку, якщо зараження відбулося нещодавно. З моменту інфікування до появи антитіл до ВПГ в крові проходить кілька тижнів.

Хибнопозитивні результати теж можливі. Якщо результат вашого тестування позитивний, але ваші шанси заразитися герпесом були дуже малі, можливо, вам необхідно пройти повторну перевірку.

Проба Тцанка і метод ПЛР

Інші способи виявлення вірусу герпесу включають дослідження на клітини Тцанка і метод ПЛР. Проба Тцанка полягає в знаходженні під мікроскопом клітин Тцанка в мазках-відбитках з ерозій і бульбашок після фарбування. Клітини, уражені ВПГ, відрізняються від здорових. Це дослідження не дуже точне, тому лікарі його не рекомендують.

В основі методу ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція) лежить виявлення невеликого фрагмента ДНК вірусу. Це досить точне дослідження, але лікарі ще не вирішили, як його слід використовувати для діагностики генітального герпесу, тому це тестування також не є кращим.

Що запитати у лікаря?

Генітальний герпес викликає безліч питань, і не важливо, чи виявили ви його у себе недавно, боріться з рецидивами, або ця інфекція є у вашого партнера. Щоб допомогти вам отримати бажані відповіді, ми склали список найбільш важливих питань, які ви можете поставити своєму лікарю.

Якщо герпес у вас діагностували нещодавно

1. Яким типом герпесвируса я заражений?
2. Як довго я вже інфікований?
3. Чи потрібно мені здати аналізи на наявність інших захворювань, що передаються статевим шляхом?
4. Як мені вберегти від інфікування свого партнера?
5. Як скоро необхідно обстежитися моєму партнерові?
6. Як часто я можу очікувати появи симптомів? Як вони вплинуть на мій спосіб життя?
7. Чи потрібно мені почати прийом ліків? Якщо не зараз, то коли мені потрібно розглянути таку можливість?
8. Ускладнить герпес мої проблеми зі здоров'ям?
9. Чи можу я планувати завести дітей?
10. Чи Можете ви порекомендувати групу підтримки або консультанта, які могли б допомогти мені впорається з цим захворюванням?

Якщо ви переживаєте рецидиви

1. Буде мені корисна щоденна супресивна терапія від герпесу, або мені краще приймати ліки тільки при появі продромальних симптомів?
2. Які ліки мені підійде, і чому?
3. Які можливі побічні ефекти?
4. Що мені робити, якщо призначене ліки викликає проблеми або не працює?
5. Чи існують інші способи полегшення симптомів?
6. Що може сприяти появі спалаху? Чи можу я змінити свій спосіб життя, щоб уникати цього?
7. Як часто повинен проходити обстеження мій постійний партнер? Скільки часу має піти перш, ніж моє новому партнерові необхідно пройти перевірку на наявність герпесвируса?
8. Що мені робити, якщо я хочу завести дітей?
9. Варто мені взяти участь у клінічних випробуваннях експериментального ліки?
10. Чи Можете ви порекомендувати групу підтримки або консультанта, які могли б допомогти мені впорається з цим захворюванням?

Якщо герпесом хворий ваш партнер

1. Якщо я інфікований, скільки часу має пройти перш, ніж вірус можна буде виявити за допомогою тестування?
2. Можливе отримання хибнонегативного результату тестування? Як я можу бути впевнений в достовірності результатів?
3. Чи потрібно мені здати аналізи на наявність інших захворювань, що передаються статевим шляхом?
4. Наскільки велика вірогідність того, що я буду інфікований партнером? Як ми можемо зменшити такий ризик?
5. Якщо я буду продовжувати підтримувати сексуальні відносини з партнером, як часто мені необхідно перевірятися на герпес?
6. Якщо я заражусь, потрібно буде нам з партнером як-небудь змінити характер наших статевих стосунків?
7. На які симптоми мені потрібно звертати увагу?
8. Чи можу я все ще планувати завести дітей зі своїм партнером?
9. Як я можу допомогти своєму партнеру справлятися з цим захворюванням?
10. Чи Можете ви порекомендувати групу підтримки або консультанта, які могли б допомогти мені впоратися з цією проблемою?

Діагностика генітального герпесу

Діагностика при наявності симптомів: посів вірусу на культурі клітин

Симптоми герпесу у різних людей можуть значно відрізнятися. Якщо людина відчуває ознаки інфекції, ми рекомендуємо йому пройти посів на культурі клітин для виявлення герпесвируса (мазок з висипань) протягом 48 годин з моменту їх виникнення. Результати зазвичай бувають готові через тиждень.

Головною перевагою посіву на культурі клітин є висока точність дослідження в разі позитивного результату. Крім того, на культурі клітин можна визначати, вірусом простого герпесу якого типу – першого чи другого, була викликана інфекція. Якщо результат лабораторної діагностики на культурі клітин виявиться у вас позитивним, можете бути впевненим, що у вас вірус герпесу.

Основним недоліком посіву на культурі клітин є високий відсоток псевдонегативних результатів. Оскільки для посіву вірус повинен перебувати в активному стані, якщо герпетичний пухирець або ранка маленького розміру або вже починає гоїтися, то для нормального дослідження кількості вірусу може бути недостатньо. При проведенні діагностики пізніше, ніж через 48 годин після появи симптомів, висока загроза хибнонегативного результату. Посів вірусу на культурі клітин буває ще менш достовірним при діагностиці під час рецидивів (позитивні результати отримують лише в 30% випадків повторних спалахів герпесу).

Введення до аналізів крові

Аналізи крові можуть використовуватися у випадках, коли людина не має видимих симптомів, але турбується про наявність у себе герпесу. Аналізи крові виявляють не вірус безпосередньо, а антитіла до нього (імунна відповідь організму), які можуть знаходитися в крові.

IgM і IgG

Існує безліч доступних аналізів крові, але більшість з них не досить точні, оскільки не можуть відрізнити антитіла до ВПГ 1-го типу і ВПГ 2-го типу. Тому досить висока ймовірність хибних результатів результату, особливо для ВПГ-2.

Коли людина контактує з герпесом, його імунна система реагує на це, виробляючи антитіла для боротьби з вірусом: імуноглобуліни класу IgG і класу IgM. Аналізи крові можуть виявляти ці антитіла, оскільки самого вірусу в крові немає. IgG підвищуються незабаром після інфікування і залишаються в крові на все життя. IgM є першими імуноглобулінами, які виникають відразу після контакту з інфекцією, але через певний час їх рівень знижується.

Тести на IgM не рекомендуються з трьох основних причин:

1. Багато хто вважає, що у разі виявлення під час тесту IgM, це буде говорити про те, що герпесом вони заразилися недавно. Тим не менш, дослідження показує, що IgM можуть підвищуватися у третини досліджуваних під час повторних спалахів герпесу, і одночасно бути відсутнім у половини людей, які нещодавно заразилися герпесом, але виявили її під час посіву вірусу на культурі клітин. Таким чином, тести на IgM можуть давати помилкові результати, а також недостовірну інформацію про те, як і коли людина заразився ВПГ. З цієї причини ми не рекомендуємо використовувати аналізи крові для визначення строків давності інфікування. На жаль, більшість людей з діагностованим герпесом не зможуть з'ясувати, як давно вони мають цю інфекцію.
2. Крім того, тести на IgM не можуть точно диференціювати антитіла до ВПГ-1 і ВПГ-2, що легко призводить до хибнопозитивних результатів за ВПГ-2. Це важливо в світлі того, що більшість дорослого населення США мають антитіла до ВПГ-1, який є основною причиною застуди на губах. Людина, що має антитіла до ВПГ-1, може отримати хибнопозитивний результат тесту на ВПГ-2.
3. Тести на IgM іноді можуть перехресно реагувати на інші споріднені віруси, як вірус варіцелла-зостер, викликає вітряну віспу, або цитомегаловірус, викликає мононуклеоз, а отже, позитивний результат може бути помилковим.
   Точні аналізи крові визначають антитіла до иммуноглобулину IgG. На відміну від тесту на IgM, цей тест може точно визначити різницю між ВПГ-1 і ВПГ-2. Нещодавнє дослідження підтверджує цю інформацію: лабораторії, які використовували для виявлення герпесу тести, не визначають антитіла до иммуноглобулину IgG, мали високий відсоток хибнопозитивних результатів антитілам до ВПГ-2 (від 14 до 88% тестів показувало, що проба крові була позитивною до ВПГ-2) в пробах, які насправді були позитивними лише для антитіл до ВПГ-1. Однак всі лабораторії, які використовують тести на імуноглобуліни класу G, в подібних випадках показували, що проби негативні до ВПГ-2.

Проблема в даному випадку полягає в тому, що час, необхідний для того, щоб антитіла до IgG досягли кількості, при якому вони могли б бути виявлені, відрізняється для кожної окремої людини. В одного це займе кілька тижнів, а в іншого – кілька місяців. Тому, навіть якщо тест виявився точним, людина може отримати псевдонегативний результат, якщо аналізи були проведені незабаром після контакту з вірусом. Для найбільш точних результатів рекомендується почекати 12-16 тижнів з моменту останнього можливого контакту з вірусом, перш ніж здавати аналізи для визначення типу ВПГ, щоб антитіла до IgG досягли кількості, при якому вони могли б бути виявлені.

Точні аналізи крові

На даний момент існує 4 аналізу крові на підставі IgG, схвалені Управлінням з контролю за продуктами і ліками (США). Вони можуть точно визначати наявність герпесу. Як будь-який інший аналіз крові, ці тести не можуть визначити, чи є інфекція оральної або генітальної. Тим не менш, оскільки в більшості випадків генітальний герпес викликається ВПГ-2, позитивний результат на антитіла до вірусу герпесу 2-го типу найчастіше свідчить про генітальному герпесі.

Ви можете запитати про цих тестах у свого лікаря, вказавши їх точну назву. Точними аналізами крові, визначають тип вірусу, є:

• Швидкий тест на ВПГ-2 Biokit
• Тести на ВПГ-1 і ВПГ-2 HerpeSelect®
• Тест на герпес Western-Blot
• Аналіз ELISA від компанії CAPTIA™ для визначення IgG ВПГ

Підготовка до відвідування лікаря з приводу генітального герпесу

Роздрукуйте цю сторінку і візьміть її з собою на прийом до лікарні. Ці ілюстрації допоможуть вам краще зрозуміти все те, про що вам буде розповідати лікар.

Крім того, під час вашого першого візиту лікар може задати вам ці питання. Витратьте трохи часу, і прочитайте їх зараз, щоб провести час в оглядовому кабінеті з максимальною користю.

• Чи з'являються у вас герпетичні висипання?
• З'являлися у вас коли-небудь герпетичні висипання або висип в області від талії до середини стегна?
• Чи є у вас подібні симптоми на даний момент? Якщо так, то коли вони з'явилися?
• Коли ви востаннє мали статевий зв'язок?
• Які частини тіла могли піддаватися контакту з вірусом під час статевої активності (наприклад, пеніс, піхву, анальний отвір)?
• Скільки у вас в житті було сексуальних партнерів?
• Чи ви мали статевий зв'язок з ким-небудь, про кого ви точно знали, що він/вона має генітальний герпес?
• Чи Вступали ви у статевий зв'язок з новим партнером за останній місяць?
• Чи завжди ви користуєтеся презервативами?

Жіноча репродуктивна система:

Чоловіча анатомія:

Протокол детального пиросеквенирования NА-Н274 вірусу грипу А (H1N1) для тестування чутливості вірусу грипу А (H1N1) до антивірусних препаратів

ВСЕСВІТНЯ ОРГАНІЗАЦІЯ Охорони ЗДОРОВ'Я

13 травня 2009 H1N1

Співпрацює центр грипу ВООЗ на базі Центру контролю і профілактики захворювань (CDC), Атланта, США, надає протокол детального пиросеквенирования NA-H274 вірусу грипу А (H1N1) для тестування вірусу грипу А (H1N1) до антивірусних препаратів.

Даний документ містить оновлення, яке стосується протоколу пиросеквенирования для тестування антивірусного сприйнятливості, опублікованого 29 квітня 2009.

Діагностика грипу

З'явилися симптоми грипу? Як діагностувати захворювання?

У більшості випадків, лікар може поставити діагноз на підставі симптомів, особливо якщо ці симптоми з'являються протягом пікового сезону епідемії грипу. Але іноді лікар може зробити додатковий експрес тест для діагностики.

Сезонні епідемії грипу призводять до 3 - 5 мільйонів випадків захворювання і 250 000 - 500 000 смертельних випадків щороку. Віруси грипу можуть викликати пандемію, такі як зареєстрована в 1918 році, яка закінчилася летально для 20 мільйонів чоловік.

Після встановлення діагнозу лікар може призначити антивірусні препарати, які на ранніх етапах є дуже ефективними. Якщо грип діагностовано протягом 48 годин після появи перших симптомів грипу, антивірусні препарати можуть полегшити ці симптоми.

Для достовірного діагнозу, лікар бере зразок секрецій з носа і горла і передає в лабораторію на аналіз. Результати можуть бути готові протягом 30 хвилин. Деякі експрес тести можуть підтвердити лише наявність вірусу грипу, інші можуть навіть ідентифікувати типи A і B.

Протокол детального пиросеквенирования М2 вірусу грипу А(H1N1) для тестування чутливості вірусу грипу А(H1N1) до антивірусних препаратів

ВСЕСВІТНЯ ОРГАНІЗАЦІЯ Охорони ЗДОРОВ'Я

13 травня 2009 H1N1

Співпрацює центр грипу ВООЗ на базі Центру контролю і профілактики захворювань (CDC), Атланта, США, надає протокол детального пиросеквенирования М2 вірусу грипу А(H1N1) для тестування чутливості вірусу грипу А(H1N1) до антивірусних препаратів.

Даний документ містить оновлення, яке стосується протоколу пиросеквенирования для тестування антивірусного сприйнятливості, опублікованого 29 квітня 2009.

Пиросеквенирование гена М2 для виявлення резистентності до препаратів похідних адамантану (амантадин і ремантадин)

ВІД-ПЛР праймери (20 мкм):

• sw-M2-F670, AGC TCC AGT GCT GGT CTG AAA G
• sw-M2-R900-biot, GAC TCA GGC ACT CCT TCC GTA GAA

Праймер послідовності (100 мкм):

• sw-M2-F747-seq, GCG ATT CAA GTG ATC C

Протокол ВІД-ПЛР: Використання системи Invitrogen Superscript III одношаговой ВІД-ПЛР з HiFi Taq-полімеразою.

Параметри циклічності ПЛР:

Протокол пиросеквинирования: Використання PyroGold реагентів (для 96 зразків)

Реакція зв'язування

1. Зв'язує буфер: 4 мл.
2. Дистильована вода (Н2О): 2 мл.
3. Гранули сефарозы (добре перемішані): 300 мкл.
4. Суміш, добре перемішана в мішалці.
5. Внести 60 мкл зв'язує буфера в кожну лунку чистого 96-лункового планшета для ВІД-ПЛР (використовувати планшет з 12 рядами).
6. Додати 20 мкл реагентів ВІД-ПЛР у відповідні лунки, містять зв'язує буфер.
7. Накрити плашку фотолентой.
8. Потрясти плашку, принаймні 10 хвилин.

Реакція відпалу:

1. Буфер для відпалу: 4.4 мл.
2. Праймер послідовності: 20мкл (sw-M2-F747 seq) на 100 мкм.
3. Перемішати в мішалці і додати 40 мкл реакції відпалу в кожну лунку 96-лункового м'якого планшета для пиросеквирования.

Порядок поділу: циклічний 60 (CATG\GT).

Використовуваний модуль: SQA (аналіз послідовності).

Аналізована послідовність:

Метою пиросеквинирования М2 є порівняння ділянок сезонних вірусів грипу H1N1 та H3N2 з вихідним зразком свинячого вірусу грипу 2009 H1N1: (при порівнянні з сезонним вірусом H1N1 спостерігається відмінність в один нуклеотид і одну амінокислоту, як це показано і виділено червоним кольором нижче).

Встановлені маркери резистентності до блокаторів М2 (амантадин і ремантадин):

• L26F (CTT\C до TTT)
• V27A (GTT до GCT)
• A30V\T (GCG до GTG), або GCN до GTN, GCG до ACG
• S31N (AGT\C до ATT\C)
• G34E (GGG до GAG)

Вихідний зразок вірусу свинячого грипу 2009 H1N1 резистентен до препаратів похідних адамантану і має зміни S31N і відповідно змінений білок М2 (AGT---AAT).